Western抗體洗脫液中文版說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
Western抗體洗脫液(Stripping buffer)又稱(chēng)膜再生液或Western一抗二抗去除液,用于Western中轉移了蛋白的膜的重復利用。在Western中完成了一抗二抗結合和后續的化學(xué)發(fā)光檢測后,有時(shí)還需要檢測GAPDH、β-actin等表達量相對穩定的管家蛋白或其它蛋白作為參照。Stripping buffer可以洗脫一抗二抗,非常方便地重新利用使用過(guò)的膜,檢測其它蛋白。 Stripping buffer多次重復使用同一張膜,會(huì )導致蛋白信號的減弱不宜重復利用膜,一般可以利用2~3次。
MBWestern Stripping buffer 主要依靠堿性來(lái)解除一抗二抗的結合,同時(shí)又不會(huì )導致轉移到膜上的蛋白的損失, 適用于Western化學(xué)發(fā)光檢測后的蛋白膜的重復利用,尤其適用于PVDF膜,其次為硝酸纖維素膜。非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測(如DAB,NBT/BCIP)不適用于本試劑。
產(chǎn)品組成:
編號 名稱(chēng) | PW0053 | PW0053 | Storage |
Western Stripping buffer(堿性) | 100ml | 500ml | RT |
使用說(shuō)明書(shū) | 1份 |
自備材料:
1、 蒸餾水
2、 搖床
3、 (可選)濾紙
4、 Western封閉液
操作步驟(僅供參考):
1、在膜完成Western化學(xué)發(fā)光檢測后,蒸餾水中漂洗5min。
2、棄蒸餾水,加入Western Stripping buffer,*覆蓋住膜。
3、搖床上漂洗5min。
4、棄液,盡量把Western Stripping buffer去除干凈,必要情況下,可以用濾紙吸干。
5、加入蒸餾水振蕩漂洗2~3次,每次漂洗3~5min。
6、入封閉液進(jìn)行封閉后(推薦酪氨酸或脫脂奶粉作為封閉液),進(jìn)行Western后續操作。
注意事項:
使用辣根過(guò)氧化物酶標記的抗體時(shí),封閉液必須使用5%脫脂奶粉配制。使用堿性磷酸酯酶標記的抗體時(shí),封閉液必須使用酪蛋白(casein)配制。
Western Stripping buffer(堿性)特別適用于PVDF膜的再生,硝酸纖維素膜的再生效果不如PVDF膜。
Western Stripping buffer(堿性)適用于ECL等類(lèi)似的化學(xué)發(fā)光液的檢測后的一抗二抗洗脫。非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測(如DAB,NBT/BCIP)不適用于本試劑。
Western Stripping buffer(堿性)有輕微腐蝕性,使用時(shí)請注意防護。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
有效期: 12個(gè)月有效。
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