在免疫組化結果的判斷時(shí)，?？梢?jiàn)到均勻一片的似非特異性染色的現象，經(jīng)多方研究認為，
冰凍切片細胞色素C氧化酶活性染色試劑盒是一種假性非特異性的染色。因為腫瘤組織中含有的抗原較易發(fā)生擴散彌散，腫瘤細胞無(wú)限制的生長(cháng)和生長(cháng)過(guò)速，導致腫瘤中間部分組織血液供給困難，造成缺血壞死，壞死細胞中的抗原由于機體的作用，可以被均勻地散布于細胞與細胞間的間質(zhì)，這是抗原發(fā)生彌散的一種方式。另一種抗原彌散的方式就是，由于組織沒(méi)有及時(shí)的固定所引起的。離體的組織不及時(shí)固定，組織就會(huì )自溶，抗原就會(huì )擴散，這是一非常普通的常識，但要做好卻是極不容易。標本從外科切除到浸入固定液需要經(jīng)過(guò)一段時(shí)間，在這段時(shí)間里，有的抗原就可以發(fā)生擴散。
在這我簡(jiǎn)單談?wù)劚鶅銮衅毎谻氧化酶活性染色試劑盒實(shí)驗中移液器的使用，還有實(shí)驗中反應時(shí)間的細節。
冰凍切片細胞色素C氧化酶活性染色試劑盒的使用方法：
1、設定移液體積：從小量程調節至大量程時(shí)，應先調至超過(guò)設定體積刻度，再回調至設定體積，這樣可以保證移液器的度；
2、裝配槍頭：將移液槍垂直插入吸頭，左右旋轉半圈，上緊即可；
3、吸液和放液：吸頭浸入液面3mm以下，吸液前槍頭先在液體中預潤洗2-3次確保移液的精度和準度，慢吸慢放，以防突然松開(kāi)溶液吸入過(guò)快而沖入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣；
4、吸有液體的移液槍不應平放；
5、移液槍在每次實(shí)驗后應將刻度調至大量程，讓彈簧回復原型以延長(cháng)移液槍的使用壽命。
實(shí)驗反應時(shí)間注意事項：冰凍切片細胞色素C氧化酶活性染色試劑盒下面我以檢測嘔吐毒素來(lái)作為例子說(shuō)說(shuō)我們在檢測實(shí)需要注意的反應時(shí)間小細節。
1、在備孔稀釋好待測樣品和標準品；
2、上板：應從后一孔上完板開(kāi)始計時(shí)，以確保反應時(shí)間；
3、加底物：應從加孔開(kāi)始計時(shí)，以確保加終止液時(shí)的反應時(shí)間是5分鐘。
蠟不溶于水，不與其它的臨床使用的抗體相融合。它只能靠特用的試劑，處理足夠的時(shí)間，才能將其除去。如果脫蠟不干凈，少許蠟存留于切片上，將會(huì )引起許多弊病，如染色不均勻，陽(yáng)性物時(shí)隱時(shí)現，真假難辨，背景染色增加等。為了解決上述的問(wèn)題，切片在染色前必須*脫蠟，目前用于脫蠟的試劑主要是二甲苯，因它脫蠟力強，脫蠟時(shí)間較短。較受使用者的青睞。
必須*抑制內源性過(guò)氧化物酶的活性，才能降低背景的染色。
在各種組織中都含有很多的內源性過(guò)氧化物酶，尤其在紅細胞，中性粒細胞，單核細胞嗜酸性細胞，出血的組織壞死的組織等等。含有這種酶的各細胞和組織如果在染色前不對其進(jìn)行處理和抑制，它們將會(huì )在DAB底物的顯色時(shí)，與HRP一樣催化底樣，使之顯色，使之生成與陽(yáng)性物一樣的黃棕色，造成混亂。為止，在活體細胞RANK免疫組化染色試劑盒染色前，都必須對內源性過(guò)氧化物酶進(jìn)行抑制。當然，對它們進(jìn)行*的消除是不行的，因為抑制太厲害，對抗原也會(huì )有相同的抑制作用。
冰凍切片細胞色素C氧化酶活性染色試劑盒須適當合理地使用封閉試劑
為了減少背景產(chǎn)生的非特異性染色，在免疫組化染色的過(guò)程中，在加入一抗孵育前，常常加入非免疫動(dòng)物血清，以減少背景的染色，陳尚季等認為：抗體是高度的電荷分子，可能與帶有相應電荷的組織成分無(wú)特異性地結合。由于這種非特異性結合，將導致標記的部分局部化和膠原的假陽(yáng)性染色。要用一種不相干的抗體居先處理，可能減少和標記的抗體無(wú)特異性結合。
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