80128.2 v.A

   冰凍切片纖維蛋白（fibrin）卡斯塔萊斯（carstairs）染色試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

（中文版）

主要用途

   冰凍切片纖維蛋白（fibrin）卡斯塔萊斯（carstairs）染色試劑是一種旨在使用三色染料（trichrome），分析和區分冰凍組織切片中的纖維蛋白和血小板成分的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心改良傳統方法、成功實(shí)驗證明的。廣泛用于心血管系統的研究等。產(chǎn)品嚴格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩定，顯色清晰。

技術(shù)背景

纖維蛋白（fibrin），又稱(chēng)為活化凝血因子I（Factor Ia），是一種嗜酸性（acidophil）不溶性非球蛋白，來(lái)自于血漿中的纖維蛋白原（fibrinogen），經(jīng)過(guò)凝血酶的水解后聚合而成。其主要功能包括信號傳導、血液凝結、血小板活化，以達到終止出血，即組織損傷引起血管和血小板開(kāi)始反應，使纖維蛋白原轉化為纖維蛋白，形成網(wǎng)架，產(chǎn)生血凝塊而止血。纖維蛋白異常增多會(huì )導致血栓（thrombosis），而產(chǎn)生不足，引起出血，例如纖維蛋白原血癥（dysfibrinogenaemia）。血小板（platelet），一種圓盤(pán)狀（flattened disc）的無(wú)核血液細胞，直徑4微米，厚度1微米，由骨髓巨核細胞產(chǎn)生，生命周期7至10天，通過(guò)肝臟和脾臟巨噬細胞排除。其功能主要為粘附、激活和聚集。其中與纖維蛋白聚集一起，構成凝。卡斯塔萊斯（carstairs）染色技術(shù)主要用于區分纖維蛋白、血小板，以及膠原蛋白和紅細胞的染色技術(shù)。   

產(chǎn)品內容

   清理液（Reagent A）           毫升

   固著(zhù)液（Reagent B）           毫升

   媒染液（Reagent C）              毫升

   梅氏液（Reagent D）                  毫升

   桔染液（Reagent E）           毫升

   品紅液（Reagent F）           毫升

   酸性液（Reagent G）           毫升

   染色液（Reagent H）           毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)              1份

保存方式

保存在4℃冰箱里，避免光照；試劑具有腐蝕性，注意安全；有效保證3月

用戶(hù)自備

小型玻璃染色缸：用于組織或切片處理的容器

培養箱或烘箱：用于樣品反應孵育

中性樹(shù)脂：用于切片封片

光學(xué)顯微鏡：用于切片染色后觀(guān)察分析

實(shí)驗步驟

1． 取出10片待測的5微米厚的冰凍組織切片

2． 小心加上xx微升   清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面

3． 室溫下孵育2分鐘

4． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

5． 小心加入xx微升   固著(zhù)液（Reagent B）在切片上，鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面

6． 室溫下箱孵育48小時(shí)或96小時(shí)

7． 小心移去   固著(zhù)液（Reagent B）

8． 室溫下，小心將切片置入xx毫升   清理液（Reagent A）中孵育2分鐘

9． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

10． 小心加入xx微升   媒染液（Reagent C）在切片上，鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面

11． 室溫下箱孵育5至10分鐘 

12． 小心移去   媒染液（Reagent C）

13． 室溫下，小心將切片置入xx毫升   清理液（Reagent A）中孵育2分鐘

14． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

15． 小心加入xx微升   梅氏液（Reagent D）在切片上，鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面

16． 室溫下孵育5分鐘

17． 小心移去   梅氏液（Reagent D）

18． 室溫下，小心將切片置入xx毫升   清理液（Reagent A）中孵育5分鐘

19． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

20． 小心加入xx微升   桔染液（Reagent E）在切片上，鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面

21． 室溫下孵育30至60分鐘 

22． 小心移去   桔染液（Reagent E）

23． 小心加入xx微升   清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面

24． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

25． 小心加入xx微升   品紅液（Reagent F）在切片上，鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面

26． 室溫下孵育1至5分鐘 

27． 小心移去   品紅液（Reagent F）

28． 室溫下，小心將切片置入xx毫升   清理液（Reagent A）中孵育2分鐘

29． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

30． 小心加入xx微升   酸性液（Reagent G）在切片上，鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面

31． 室溫下孵育2分鐘，或直至肌肉呈現紅色（注意：可以鏡下觀(guān)察） 

32． 小心移去切片上的   酸性液（Reagent G）

33． 室溫下，小心將切片置入xx毫升   清理液（Reagent A）中孵育2分鐘

34． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

35． 小心加上xx微升    染色液（Reagent H）在切片上，鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面

36． 室溫下孵育10分鐘至2小時(shí)，或直至膠原纖維顯示藍色（注意：可以鏡下觀(guān)察）

37． 小心移去切片上的   染色液（Reagent H）

38． 室溫下，小心將切片置入xx毫升   清理液（Reagent A）中孵育2分鐘

39． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

40． 放上蓋玻片或封片（中性樹(shù)脂）

41． 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察：

注意事項

1． 本產(chǎn)品為50次操作

2． 操作時(shí)，須戴手套

3． 試劑具有腐蝕性，注意操作安全 

4． 建議使用玻璃染色缸

5． 每次更換試劑溶液時(shí)，保持切片面基本晾干

6． 試劑溶液在切片表面時(shí)，避免有氣泡存在，同時(shí)確保鋪滿(mǎn)切片表面

7． 整個(gè)操作，在避光狀態(tài)下進(jìn)行

8． 染色完成后，即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀(guān)察 

9． 樣品染色后保存，避免光照

10． 本公司提供系列纖維蛋白染色試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標準

1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩定

2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰