冰凍切片細胞色素C氧化酶活性染色試劑盒內質(zhì)呈淡藍黑色,外質(zhì)收縮,剩下部分不著(zhù)色或色澤更淺。圓形細胞核呈藍黑色。居中的核仁呈黑色小圓點(diǎn)。核膜較薄,其內側緣均勻,整齊地排列著(zhù)一層細小的染色質(zhì)粒。核仁與核膜之間可見(jiàn)到核網(wǎng)。被吞噬的紅細胞呈藍黑色采用蘇木素染色液進(jìn)行免疫染色后的復染,操作步驟簡(jiǎn)便,操作時(shí)間短??梢圆僮鞑襟E簡(jiǎn)便,操作時(shí)間短或培養細胞的染色,或與免疫組織化學(xué)、免疫細胞化學(xué)、免疫熒光、原位雜交等配合使用。使用蘇木素染色液染色后還可以進(jìn)行免疫染色或其它染料的復染。
冰凍切片細胞色素C氧化酶活性染色試劑盒操作步驟(僅供參考)
1、涂片:取待檢細菌,于載玻片中央涂成薄層或者或在載玻片上滴加少許無(wú)菌水,取菌與的水混合均勻,涂成一薄層。
2、干燥:涂片后在室溫下自然干燥,也可在酒精燈上略加溫,使之迅速干燥。
3、固定:手持載玻片一端,標本面朝上,在酒精燈的火焰外側快速來(lái)回移動(dòng)3~5次,每次1s,溫度不宜過(guò)高,防止菌體蛋白變性,放置待涼后染色。也可以用甲醇或乙醇固定。
4、初染:滴加結晶紫染色液染色1~2min,清水沖洗去染色液。
5、媒染:滴加Gram碘液,并覆蓋載玻片,室溫放置1~2min,水洗。
6、脫色:滴加脫色液,搖動(dòng)10~30s,直至流下的脫色液不出現紫色時(shí)為止,立即用水沖去脫色液,終止反應。
7、復染:滴加沙黃染色液染色30s~1min,水洗。
8、干燥。
9、鏡檢:置油鏡觀(guān)察。
冰凍切片細胞色素C氧化酶活性染色試劑盒注意事項
1、涂片之前,應事先在背面做好圓圈標記,以便判斷后續試驗的位置。
2、取細菌時(shí),應注意自我防護,拔或塞試管塞時(shí),應將試管口通過(guò)火焰略加燒灼,zui后將接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌。
3、加熱固定涂片時(shí),應注意玻片勿太靠近火焰,一般要求玻片溫度不超過(guò)60℃,以玻片背面觸及手背皮膚不覺(jué)過(guò)燙為宜。
4、革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴格掌握脫色程度,脫色時(shí)間應根據經(jīng)驗判斷。脫色過(guò)度,陽(yáng)性菌可被誤染為陰性菌;脫色不夠,陰性菌可被誤染為陽(yáng)性菌。
5、待檢細菌培養時(shí)間也會(huì )影響染色效果,陽(yáng)性菌培養時(shí)間過(guò)長(cháng)或已死亡或細菌溶解,都常呈陰性反應。
6、上述試劑均對人體有刺激性,請注意適當防護。