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對于全組織細胞色素C氧化酶活性染色試劑盒技術(shù)要求分析辦法

更新時(shí)間:2018-08-09  |  點(diǎn)擊率:998
   全組織細胞色素C氧化酶活性染色試劑盒是一類(lèi)熒光成像工具,用來(lái)標記亞細胞,細胞器;例如細胞膜、溶酶體、線(xiàn)粒體和細胞核等。全組織細胞色素C氧化酶活性染色試劑盒提供的細胞及相關(guān)細胞器熒光標記方案,每種檢測方案均能提供藍色/綠色/紅色/橙色等不同熒光檢測方法。這種的細胞標簽為從空間上和時(shí)間上研究發(fā)生的細胞活動(dòng)提供了一種十分有效的方法。
 
  全組織細胞色素C氧化酶活性染色試劑盒是設計用來(lái)標記活細胞的線(xiàn)粒體的,使之帶紅色熒光。本試劑盒使用一種專(zhuān)屬染料,選擇性地在不同膜電位的線(xiàn)粒體中積累。這種線(xiàn)粒體指示劑是一種疏水性復合物,可以輕易地滲透進(jìn)入活細胞中,且當進(jìn)入細胞后就被鎖定在線(xiàn)粒體中。這種熒光性線(xiàn)粒體指示劑可以在線(xiàn)粒體中保留很長(cháng)時(shí)間,因為該指示劑帶有能定位于細胞的基團。
 
  其關(guān)鍵特征是其染色效率顯著(zhù)性提高。本標記方法十分穩定,需要親手操作的地方很少。它可以用于許多熒光研究中,例如微孔板分析,免疫組化和流式細胞術(shù)。全組織細胞色素C氧化酶活性染色試劑盒也可以用于多種不同類(lèi)型的研究中,包括細胞粘附性、趨化性、多藥物抗性、細胞活性、細胞凋亡和細胞毒性的研究。本試劑盒提供所有的必需組分和佳細胞標記方法。它適用于增殖型和非增殖型細胞,也可以用于懸浮和貼壁細胞。
 
  疫印跡重要也是后一步就是酶與底物反應進(jìn)行檢測,本試劑盒以化學(xué)熒光發(fā)光方法檢測蛋白質(zhì)或核酸類(lèi)生物大分子。其原理是,蛋白質(zhì)或核酸在電泳后轉移到印跡膜上,以一抗及辣根過(guò)氧化物酶HRP標記的二抗結合膜上的目的蛋白,或以HRP標記的探針直接或間接結合膜上的核酸。
 
  洗膜后用本產(chǎn)品配制的ECL工作液,在可見(jiàn)光下室溫孵育膜數分鐘,將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于X光片曝光暗盒。然后轉入暗室將X光膠片壓在膜上曝光數秒到數分鐘至數小時(shí)。顯影定影后蛋白質(zhì)或核酸條帶可清晰顯示在X光膠片上。也可不進(jìn)行X光膠片曝光直接對印跡膜進(jìn)行熒光CCD掃描。
 
  全組織細胞色素C氧化酶活性染色試劑盒注意事項:
 
  1、染色后請盡快檢測。
 
  2、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
 
  3、染色時(shí)間根據不同樣本的實(shí)際染色結果做相應調整。
 
  4、PI有毒,操作時(shí)要戴上手套。
 
  5、流式檢測細胞凋亡時(shí),其DNA可染性降低被認為是凋亡細胞的標志之一,但這種DNA可染性降低也可能是因為DNA含量的降低,或者是因為DNA結構的改變使其與染料結合的能力發(fā)生改變所致。
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