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活體細胞RANK免疫組化染色試劑盒的技術(shù)使用

更新時(shí)間:2017-11-28  |  點(diǎn)擊率:814
     活體細胞RANK免疫組化染色試劑盒原理很簡(jiǎn)單,蘇木素染色法也是常用的一種染色方法。木素染色后的細胞核呈現藍色,細胞漿呈現粉紅色或紅色。染色液也可以重復使用,直至認為效果不佳時(shí)再換用新的染色液。
    活體細胞RANK免疫組化染色試劑盒內質(zhì)呈淡藍黑色,外質(zhì)收縮,剩下部分不著(zhù)色或色澤更淺。圓形細胞核呈藍黑色。居中的核仁呈黑色小圓點(diǎn)。核膜較薄,其內側緣均勻,整齊地排列著(zhù)一層細小的染色質(zhì)粒。核仁與核膜之間可見(jiàn)到核網(wǎng)。被吞噬的紅細胞呈藍黑色采用蘇木素染色液進(jìn)行免疫染色后的復染,操作步驟簡(jiǎn)便,操作時(shí)間短??梢圆僮鞑襟E簡(jiǎn)便,操作時(shí)間短或培養細胞的染色,或與免疫組織化學(xué)、免疫細胞化學(xué)、免疫熒光、原位雜交等配合使用。使用蘇木素染色液染色后還可以進(jìn)行免疫染色或其它染料的復染。
    活體細胞RANK免疫組化染色試劑盒時(shí)間的把握?
    (1)蘇木素復染時(shí)間要看當時(shí)的室溫、溶液的新舊、目標抗原的定位等情況,一般數秒-數分鐘。不過(guò)這個(gè)如果染色不理想可以補救的。即:染色深則分化時(shí)間稍長(cháng)些即可;染色淺則再置于蘇木素中染色即可。
    (2)鹽酸酒精是分化,氨水是返蘭。作用不同。片子復染完后流水振洗,然后置于鹽酸酒精中數秒(一定動(dòng)作要快)后拿出流水振洗,在放入氨水中返蘭即可。
    (3)如果分化的顏色過(guò)淺,可以復置于蘇木素中染色。
    線(xiàn)粒體是細胞中重要的細胞器,其主要功能是提供細胞內各種物質(zhì)代謝所需要的能量。線(xiàn)粒體大量存在于代謝旺盛的細胞中,如動(dòng)物的心肌,肝,腎等器官和組織的細胞中。大量制備線(xiàn)粒體就是從這些器官組織中提取,或從組織培養細胞中提取。在光學(xué)顯微鏡下線(xiàn)粒體呈現為顆粒狀、棒狀或彎曲細線(xiàn)。線(xiàn)粒體熒光探針,是一種含有硫醇氯甲基基團的熒光染料,自由通過(guò)細胞膜,選擇性地聚集在線(xiàn)粒體。它可以對活細胞進(jìn)行直接染色,在580nm波長(cháng)可以清晰看到被染成紅色的線(xiàn)狀或顆粒小體的線(xiàn)粒體。并可以分析線(xiàn)粒體膜電位,以檢測線(xiàn)粒體活性。
    活體細胞RANK免疫組化染色試劑盒染色原理:
    1、細胞核染色的原理:
    蘇木素為堿性天然染料,可使細胞核著(zhù)色。細胞核內染色質(zhì)的成分主要是DNA,在DNA雙螺旋結構中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。
    2、細胞漿染色的原理:
    伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,在一定條件下可使細胞漿著(zhù)色。細胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物,細胞漿的染色與染液的pH值密切相關(guān)。當染液的pH值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)以下時(shí),胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,則細胞漿帶正電荷,就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽(yáng)離子結合,使細胞漿著(zhù)色,呈現紅色。
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